β-葡萄糖醛酸酶

3.2.1.31 ( BRENDA | IUBMB )

β-D-葡糖醒酸苷葡糖醒酸苷水解酶
葡萄糖醛酸化是新陈代谢的基本原则之一。许多呈现给人体的物质都经历代谢过程，包括通过UDP-葡萄糖醛酸转移酶(UGT)与葡萄糖醛酸结合。这种酶催化葡萄糖醛酸基转移到许多生物和药理活性的内源性和外源性分子。与原始分子相比，葡萄糖醛酸苷通常更易溶解，毒性更小，更容易被人体排泄。为了分析体液(如尿液和血浆)中存在的这些药物缀合物，葡萄糖醛酸苷的去缀合是必要的。
用于掺杂的物质与葡萄糖醛酸结合，这意味着有效的掺杂分析通常依赖于由β-葡萄糖醛酸酶对结合药物分子进行酶促裂解。

酶特性
大肠杆菌β-葡萄糖醛酸酶基本上不具有硫酸酯酶活性，在切割类固醇和苯二氮杂共轭物方面特别有效。
β-D-葡糖醒酸苷葡糖醒酸苷水解酶
EC 3.2.1.31

切割末端葡萄糖醛酸，β-与单糖、寡糖或多糖或苯酚相连。

β-葡萄糖醛酸酶已广泛用于研究和分析实验室，用于酶法水解类固醇β-葡萄糖醛酸苷。β-葡萄糖醛酸酶用于：

• 水解尿液(pH6.0–6.5)中的类固醇缀合物(葡萄糖苷酸)；
• 分析兴奋剂；
• 检测小剂量苯二氮。
• 在GC-MS、HPLC、免疫测定或其他分析方法之前，在样本制备过程中，用于切割葡萄糖醛酸苷。

它已被用于水解血浆肠内酯、睾酮和表睾酮葡萄糖醛酸苷。

葡萄糖醛酸化是新陈代谢的基本原理之一。提供给人体的许多物质都要经过代谢处理，包括在UDP-葡萄糖醛酸基转移酶(UGT)作用下与葡萄糖醛酸结合。β-葡糖苷酸，也称为β-D-葡萄糖苷酸，可催化葡萄糖醛酸基转移至许多生物学和具有药理学活性的内源性和外源性分子。与原来的分子相比，葡糖苷酸通常更易溶、毒性更小、且更易被人体排泄。为了分析这些存在于体液(如尿液和血浆)中的药物偶联物，必须对葡糖苷酸进行解偶。分析过程中，检测前的酶促水解对于实现高灵敏度必不可少。水解后，样品可通过质谱法、气相色谱法、HPLC、免疫测定法或其他分析方法进行分析。

β-来自大肠杆菌的葡糖苷酸对β-葡糖苷酸具有高度特异性，能够非常快速地水解类固醇β葡糖苷酸以及裂解许多其他类型的葡糖苷酸，比如苯二氮、类鸦片活性肽和大麻素等。β-葡糖苷酸可用于生物液体(主要是尿液)中葡糖苷酸的酶促水解。用于掺杂的物质与葡糖苷酸结合，这意味着有效的掺杂分析通常依赖于由β-葡糖苷酸对结合药物分子进行酶促裂解。

• 基于酶′的高比活性执行快速分析。
• 快速筛查类固醇、苯二氮、大麻素和阿片。
• 节省时间，不需要清理反应或缓冲尿液就可以开始流程。

β-葡萄糖醛酸酶活性的国际单位是酶活性，在+25 ℃条件下，当pH为7.0时，将4-硝基苯基-β-D-葡萄糖醛酸苷(4NPG)的对硝基苯酚的释放速率提高1 μM。
Fishman单位以前使用过。这个单位是酚酞从葡萄糖醛酸化物(PPG)中的释放。无法通过比较类固醇β-葡萄糖醛酸苷不同制剂就PPG的活性来测量相对活性。许多制剂不会均等催化尿液中PPG、4NPG或各种类固醇β-葡萄糖醛酸苷的水解。基于以下考虑，选择4NPG作为标准底物：

• 两种底物的米氏浓度相似(对于4 NPG，K_M = 2 ×10^-4 M；对于PPG，K_M = 6 ×10^-5 M)，但相应的水解速率不同：
• 4NPG水解速率约为PPG的5倍；
• 对PPG来说，底物过量会产生抑制作用；使用4NPG时，则没有发现这一点。

50%甘油溶液，pH约为6.5
(一瓶15 ml)

大肠杆菌β-葡糖苷酸基本上不具有硫酸酯酶活性，在裂解类固醇和苯二氮偶联物时特别有效。
仅用于生命科学研究。不用于诊断操作。

本产品的销售不排除或授予第三方专利的任何权利，包括F.Hoffmann - La Roche AG集团所属公司的专利，特别是使用该产品获得的改造抗体的使用。

100

Escherichia coli K12

solution

~80 units/mg protein (Glucuronidase at 25 ℃, or 140 U/mg at 37 ℃, at pH 7 with 4-nitrophenyl-β-D-glucuronide as substrate; 1 ml β-Glucuronidase contains at least 140 U at 37 ℃.)

M_r ~220 kDa

pkg of 1 mL (03707580001)
pkg of 15 mL (03707601001)
pkg of 5 mL (03707598001)

Roche

48 ℃ optimum reaction temp.

6.0-6.5

detection
sample preparation

wet ice

2-8℃

12 - Non Combustible Liquids

WGK 1