抗三甲基组蛋白H3(Lys4)抗体

32160702

NA.41

组蛋白是高度保守的蛋白质，可作为将核 DNA 组织成染色质的结构支架。组蛋白修饰可调节 DNA 转录、修复、重组和复制。四个核心组蛋白(H2A、H2B、H3和H4)中每种两个分子可形成一个八聚体，DNA被包裹在称为核小体的重复单元中，这限制了DNA对需要DNA作为模板的细胞机制的可及性。它们在转录调节、DNA修复、DNA复制和染色体稳定性中起着核心作用。DNA的可及性是通过对组蛋白进行复杂的翻译后修饰(也称为组蛋白编码)和核小体重塑来调节的。H3具有一个主要的球状结构域和一个长N末端的尾巴，其与核糖体核小体′串珠′结构体的结构有关。组蛋白H3的N末端尾部从球状核小体核心突起，其可能发生几种不同类型的表观遗传修饰，从而影响细胞过程。这些修饰包括甲基或乙酰基与赖氨酸和精氨酸的共价连接，以及丝氨酸或苏氨酸的磷酸化。据报道，H3K4me3 修饰始终在转录起始位点发生，H3K4me3 结构域与在胚胎植入前发育以及从内部细胞团衍生出胚胎干细胞和从滋养外胚层衍生出滋养层干细胞的过程中较高的转录活性和细胞标识有关。(参考文献：Liu, W., et al. 2016.Nature 537; 7621:558-562.

基于物种之间极端保守的同源性，预计会与大多数其他物种发生反应。
该抗体仅检测在赖氨酸 4 上被三甲基化的组蛋白 H3。

对应于组蛋白 H3 的三甲基化 Lys 4 在内和周围残基的合成肽。
表位：三甲基化(Lys4)

芯片分析
一个独立的实验室表明，该抗体在染色质免疫沉淀(ChIP)中起作用。
点印迹分析：一个代表性批次以 1：10,000 的稀释度在 Absurance Histone H3 抗体特异性阵列(货号 16-667)和 Absurance Histone H2A、H2B、H4 抗体特异性阵列(货号 16-665 号)中检测到三甲基组蛋白 H3(Lys 4)。
ChIP-seq 分析：
使用 Magna ChIP HiSens 试剂盒(货号 17-10460)，1 µL 抗三甲基组蛋白 H3(Lys4)抗体(货号 07-473)，20 µL 蛋白 A/G 珠和 1e6 交联 HeLa 进行染色质免疫沉淀细胞染色质，然后使用磁珠纯化 DNA。使用标准规程从 Input 和 ChIP DNA 样品制备文库，带 Illumina 条形码适配器，并在 Illumina HiSeq 仪器上进行分析。在去除 TagDust(http://genome.gsc.riken.jp/osc/english/dataresource)标签后，使用 Bowtie(http://bowtie-bio.sourceforge.net/manual.shtml)映射了 FastQ 文件中的超过 1800 万次读取。使用 MACS(http://luelab.dfci.harvard.edu/MACS/)识别峰，并从 BigWig 和 BED 文件在 UCSC Genome Browser(http://genome.ucsc.edu)中以自定义轨道的形式显示峰和读数。在 07-473 数据集中识别出的最高 25％ 峰与 HeLa S3 的 ENCODE H3K4me3 BROAD 组蛋白轨迹中识别出的峰有 99％ 重叠。
抗三甲基化组蛋白 H3(Lys4)抗体是兔多克隆抗体，用于检测在赖氨酸 4 处三甲基化的组蛋白 H3。也被称为抗 H3K4me3，这种高度特异性和高度公开的抗体已在 ChIP、DB、WB、PIA、ChIP-seq 中得到验证。
研究类别
表观遗传学&核功能
研究子类别
组蛋白

通过蛋白质印迹法对 HeLa 酸提取的核制剂(阳性)和重组组蛋白 H3(阴性)进行了评估。

蛋白质印迹分析：
该抗体以 1：5,000：– 1：10,000 的稀释度在 HeLa 核酸提取物中检测到三甲基化组蛋白 H3(Lys4)。

替代品：04-791

亲和纯化
在含 0.1M Tris-甘氨酸(pH 7.4)，150mM NaCl 和 0.05％ 叠氮化钠的缓冲液中的亲和纯化的兔多克隆抗体。

对照
HeLa 核提取物

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

rabbit

100

affinity isolated antibody

primary antibodies

polyclonal

affinity chromatography

human, vertebrates

Upstate^®

ChIP: suitable (ChIP-seq)
dot blot: suitable
western blot: suitable

NM_003493

Q16695

wet ice

观察分子量为〜17 kDa；计算分子量为15.51 kDa。在某些裂解物中可以观察到未鉴定的条带。

自发运之日起，在 2-8ºC 条件下可稳定保存1年

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12 - Non Combustible Liquids

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