蛋白酶 K 来源于林伯氏白色念球菌

3.4.21.64 ( BRENDA | IUBMB )

254-457-8

MFCD00132129

32160410

NA.54

该酶(来自 Sigma)可用于在从解脂耶氏酵母中提取泛醌之前，降解复合物 I(NADH：泛醌氧化还原酶)。它也可用于检测蛋白酶 k 对极腐霉的影响。在沉淀浆液中，它也可使水解的肽键的种类最大化，而酶本身不会自溶产生氨基酸。
在分离DNA和RNA的过程中，用于核酸酶的蛋白水解失活。
用于去除内毒素结合的阳离子蛋白，如溶菌酶和核糖核酸酶A。
据报道，其可用于分离肝、酵母和绿豆线粒体
用于测定酶在细胞膜上的定位
用于石蜡包埋组织切片的处理，暴露用于抗体标记的抗原结合位点。
用于可传播海绵状脑病(TSE)研究中朊病毒脑组织样本蛋白的消化。
在分离 DNA 和 RNA 期间，蛋白酶 K 可用于核酸酶的蛋白水解失活。它用于清除与阳离子蛋白质(如溶菌酶和核糖核酸酶 A)结合的内毒素。它还可用于分离肝脏、酵母和绿豆线粒体，并用于确定酶在膜上的定位。此外，它用于处理石蜡包埋的组织切片，有助于暴露抗原结合位点和用于消化脑组织样品中蛋白质。产品 P8044 冻干粉有售。

蛋白酶 K 对天然蛋白质活性高。它具有广泛的特异性，即使在自然状态下也会降解许多蛋白质。它主要裂解与脂肪族羧基相邻的肽键，以及带有受阻 α-氨基的芳香族氨基酸。 最佳 pH 值为 7.5-9.0，等电点为 8.9。激活需要 Ca²⁺(1-5mM)。蛋白酶 K 被二异丙基氟磷酸盐(DFIP)和苯基甲磺酰氟(PMSF)抑制。
蛋白酶K是一种稳定且具有高活性的丝氨酸蛋白酶。晶体和分子结构研究证据表明该酶属于枯草素家族，具有活性位点催化三联体(Asp³⁹-His⁶⁹-Ser²²⁴)。它在一系列广泛的环境中均稳定：pH，缓冲盐，去污剂(SDS)以及温度。 在0.1-0.5% SDS存在的情况下，蛋白酶K可保持活性，在不损害分离DNA完整性的前提下，可以消化DNA制剂中的多种蛋白质和核酸酶。

在 pH7.5，37℃ 下，一个单位的酶将水解尿素变性血红蛋白，并产生相当于每分钟 1.0 μmole 酪氨酸的颜色(Folin-Ciocalteu 试剂的颜色)。

lyophilized powder

200

≥3.0 unit/mg solid

28.93 kDa

Protein, ≥15% biuret

diagnostic assay manufacturing

−20℃

250 mg in glass bottle
1, 5 g in glass bottle

GHS08

Danger

H315 - H319 - H334

P261 - P264 - P280 - P302 + P352 - P304 + P340 + P312 - P305 + P351 + P338

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2

11 - Combustible Solids

WGK 1

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves