过氧化物酶 来源于辣根

1.11.1.7 ( BRENDA | IUBMB )

232-668-6

MFCD00071339

32160410

NA.54

辣根过氧化物酶是从辣根(Amoracia rusticana)中分离出来的，属于过氧化物酶的铁原卟啉基团。HRP是含有四个二硫键的单链多肽。它是一种含有18%碳水化合物的糖蛋白。碳水化合物由半乳糖、阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、甘露糖、甘露糖胺和半乳糖胺组成，具体取决于特定同工酶。其分子量(约44 kDa)包括多肽链(33,890道尔顿)、氯化血红素加Ca²⁺ (约700道尔顿)和碳水化合物(约9,400道尔顿)。至少存在7种HRP同工酶。 辣根过氧化物酶同工酶的等电点范围为3.0-9.0。

在成熟高羊茅叶片提取物的过氧化物酶测定过程中，该酶已被用于对照。它也被用来测定H₂O₂ 的产生。
辣根过氧化物酶(HRP)分离自辣根中(Amoracia rusticana)。 它可用于生物化学应用，如蛋白质印迹、ELISA和免疫组织化学。 辣根过氧化物酶可用于扩增弱信号并增加靶分子(例如蛋白质)的可检测性。 辣根过氧化物酶(产品P8250)已被用于研究发炎的牙龈中的非口腔抗原 和埃博拉病毒糖蛋白毒性。

当与底物一起孵育时，辣根过氧化物酶会产生所标记分子的有色、荧光或发光衍生物，从而实现定量。 研究已显示辣根过氧化物酶可略微降低cydAB突变体中的抑制水平。
HRP易与过氧化氢(H₂O₂)结合，所得[HRP-H₂O₂]复合物可以氧化各种氢供体。最适pH值为6.0-6.5，酶在5.0-9.0的pH范围内最稳定。HRP可以通过几种不同的方法与抗体结合，包括戊二醛，高碘酸盐氧化，通过二硫键，以及通过氨基和巯基定向交联剂。它比酶标记β-半乳糖苷酶和碱性磷酸酶更小且更稳定。因此，它是最理想的标签。而且，其糖基化会产生较低的非特异性结合。它还可用于在溶液中测定葡萄糖 和过氧化物 。已发现叠氮化钠、氰化物、L-胱氨酸、重铬酸盐、亚乙基硫脲、羟胺、硫化物、钒酸盐、对氨基苯甲酸、以及Cd²⁺、Co²⁺、Cu²⁺、Fe³⁺、Mn²⁺、Ni²⁺、铅²⁺ 等离子可抑制其酶活性。

初步的工作表明它含有至少五种同工酶。

一个连苯三酚单元将在20℃、pH 6.0条件下，在20秒内从连苯三酚形成1.0mg的红棓酚。

RZ(Reinheitszahl)是指溶于去离子水中的酶(0.5–1.0 mg/ml)的吸光度比值A₄₀₃/A₂₇₅ 。 它是血红素含量的量度，而不是酶活性。 即使是RZ值较高的制剂也可能具有较低的酶活性。

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300

Type II

essentially salt-free, lyophilized powder

150-250 units/mg solid (using pyrogallol)

~44 kDa

0.1 M phosphate buffer: soluble (pH 6.0)
H₂O: soluble

RZ ≥1.8

diagnostic assay manufacturing

2-8℃

5000, 25000, 50000, 100000, 200000 units in glass bottle

GHS08

Danger

H334

P261 - P284 - P304 + P340 + P312 - P501

Resp. Sens. 1

11 - Combustible Solids

WGK 3

Eyeshields, Gloves, type N95 (US)